检测方法: 双抗体夹心法 1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 2.加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 3.加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 4.加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5.终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 6.结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 大鼠B细胞活化因子elisa试剂盒特点: 1.高xiao、灵敏、特异的抗体; 2.稳定的重复性和可靠性; 3.吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体; 4.适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型; 5.节省实验经费。 注意事项: 在收集标本前必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成分是否足够稳定,我们提倡新鲜标...
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